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華南師大劉彥梅研究員團隊在《Nature Communications》發表基因編輯領域重要進展

來源:華南師范大學      2022-06-20
導讀:近日,華南師范大學腦科學與康復醫學研究院青年拔尖人才劉彥梅與青年英才秦偉、生命科學學院青年英才梁芳、廣東省人民醫院費繼鋒教授合作,在基因編輯領域取得了重要進展。該研究通過純化蛋白并結合化學修飾gRNA的方法優化了SpCas9新變體SpG和SpRY在斑馬魚基因組的應用,并生成了SpRY介導的胞嘧啶堿基編輯器SpRY-CBE4max和腺嘌呤堿基編輯器zSpRY-ABE8e,突破了PAM的限制,實現了一些以前無法觸及的疾病相關遺傳變異,顯著提高了CRISPR-Cas在斑馬魚基因組中的靶向性。相關成果以“SpG and SpRY variants expand the CRISPR toolbox for genome editing in zebrafish”為題于6月14日發表在《Nature Communications》上。

在該研究中,研究團隊首先通過純化含有 bpNLS 的蛋白質和 MS 修飾的 gRNA,使得SpG和SpRY變體在斑馬魚基因組中可以有效地靶向幾乎所有PAM 的位點。之后,研究團隊借助SpRY無PAM限制的特性,又構建了可以靶向單堿基的單堿基編輯工具SpRY-CBE4max 和 zSpRY-ABE8e。通過大量的位點驗證,脫靶率分析以及產物純度分析等,證實這些工具可以有效地編輯以前工具無法編輯的位點,并利用這些工具成功構建了2種新的斑馬魚疾病模型。這些新開發的基因編輯工具將促進斑馬魚模型在揭示基因功能、生理機制以及疾病發病機制和治療中的應用。

我校梁芳為論文第一作者,秦偉和劉彥梅為本論文的共同通訊作者,我校為第一完成單位。該研究得到了國家重點研發計劃、國家自然科學基金、廣東省重點領域研究發展計劃及廣東省水產經濟動物病原生物學與流行病學重點實驗室研究基金的支持。

原文鏈接:https://www.nature.com/articles/s41467-022-31034-8#ref-CR37

參考資料:https://news.scnu.edu.cn/51721




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